lip3000脂質(zhì)體3000是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中，脂質(zhì)體疏水尾部伸向空氣，攪動(dòng)后形成雙層脂分子的球形脂質(zhì)體，直徑25~1000nm不等。脂質(zhì)體可用于轉(zhuǎn)基因，或制備的藥物，利用脂質(zhì)體可以和細(xì)胞膜融合的特點(diǎn)，將藥物送入細(xì)胞內(nèi)部生物學(xué)定義：當(dāng)兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時(shí)，分子的疏水尾部傾向于聚集在一起，避開水相，而親水頭部暴露在水相，形成具有雙分子層結(jié)構(gòu)的的封閉囊泡，稱為脂質(zhì)體。藥劑學(xué)定義脂質(zhì)體(liposome):系指將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型泡囊體。
使用試劑，您可以獲得：
1、在多種細(xì)胞系中具有*地轉(zhuǎn)染效率和較高水平地重組蛋白表達(dá)。
2、傳輸siRNA的優(yōu)異性能。
3、在有血清存在的情況下可保證轉(zhuǎn)染效力——轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基。
4、保證可以用于高通量應(yīng)用的試劑。
5、用于建立穩(wěn)定細(xì)胞系的可靠試劑lip3000脂質(zhì)體3000試劑為大多數(shù)細(xì)胞提供了zui高的轉(zhuǎn)染效率和活性。當(dāng)存在血清或用于進(jìn)行蛋白表達(dá)的細(xì)胞系（如COS-7，CHO和293）時(shí)，
lip3000脂質(zhì)體3000尤為有效，效率可超過90%。
注意事項(xiàng)：
要求細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳，這有助于減少陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性造成的影響。可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基，使得操作方便了許多，但是要注意制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑，因?yàn)檠鍟?huì)影響復(fù)合物的形成。
復(fù)合物形成后是可以加入血清。這里要特別注意檢測所用的無血清培養(yǎng)基是否能和lip3000脂質(zhì)體3000匹配，比如已知CD293,SFMII,VP-SFM就不行。此外還應(yīng)該留意，如果研究的基因要求比較長的表達(dá)時(shí)間，比如細(xì)胞周期相關(guān)基因，或者時(shí)細(xì)胞表面蛋白，選擇細(xì)胞鋪板密較低的轉(zhuǎn)染試劑，不適合用lip3000脂質(zhì)體3000。
對于大多數(shù)陽離子脂質(zhì)體試劑，應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到zui大的轉(zhuǎn)染效率。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2或者1:3，優(yōu)化可以從0.5-5之間慢慢試。使用小劑量確定的優(yōu)化條件可以用于進(jìn)行大劑量的轉(zhuǎn)染，只要根據(jù)培養(yǎng)板表面比例線性增加鋪板細(xì)胞的數(shù)目、陽離子脂質(zhì)體試劑和DNA量就可以了。
還有轉(zhuǎn)染的時(shí)候培養(yǎng)基中不能添加抗生素。抗生素，比如青霉素和鏈霉素，一般對于真核細(xì)胞無毒，但陽離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性，使抗生素可以進(jìn)入細(xì)胞。這降低了細(xì)胞的活性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低。所以，在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中不能使用抗生素，甚至在準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染前進(jìn)行細(xì)胞鋪板時(shí)也要避免使用抗生素。這樣，在轉(zhuǎn)染前就不必潤洗細(xì)胞。對于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，不要在選擇性培養(yǎng)基中使用青霉素和鏈霉素，因?yàn)檫@些抗生素是GENETICIN選擇性抗生素的競爭性抑制劑。另外，為了保證無血清培養(yǎng)基中細(xì)胞的健康生長，使用比含血清培養(yǎng)基更少的抗生素量。
陽離子脂質(zhì)體應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長時(shí)間開蓋，因?yàn)榭赡軙?huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。當(dāng)然還有要注意質(zhì)粒的質(zhì)量，質(zhì)粒的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵。
會(huì)員_a.png)